查爾酮異構(gòu)酶(CHI)測(cè)試盒

商品詳情：
查爾酮異構(gòu)酶(CHI)測(cè)試盒測(cè)定意義：

查爾酮異構(gòu)酶(Chalcone isomerase, CHI)是第一個(gè)被認(rèn)識(shí)的黃酮類化合物合成相關(guān)酶，也是黃酮代謝途徑中的關(guān)鍵酶之一。查爾酮異構(gòu)酶和查爾酮合酶一起構(gòu)成了黃酮類化合物生物合成的限速酶。

測(cè)定原理：

查爾酮異構(gòu)酶(CHI)催化查爾酮環(huán)化形成 4,5,7-三羥基黃烷酮，通過(guò)測(cè)定381nm下的吸光度變化表示CHI的活性。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提取：

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來(lái)水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬(wàn)。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過(guò)高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。

抗3抗體IgGELISA試劑盒 PR3 Ab-IgG免費(fèi)代測(cè)試劑

抗單鏈DNAELISA試劑盒 ssDNA免費(fèi)代測(cè)試劑

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抗促卵泡素抗體ELISA試劑盒 Anti FSH Ab免費(fèi)代測(cè)試劑

抗丙型肝炎病毒抗體ELISA試劑盒 anti-HCV免費(fèi)代測(cè)試劑

抗斑疹傷寒抗體ELISA試劑盒 anti-typhus-Ab免費(fèi)代測(cè)試劑

抗白色念珠菌ELISA試劑盒 C.albicans免費(fèi)代測(cè)試劑

抗白蛋白抗體ELISA試劑盒 AAA免費(fèi)代測(cè)試劑

抗β2糖蛋白IELISA試劑盒 IgG免費(fèi)代測(cè)試劑

抗α干擾素抗體ELISA試劑盒 IFNα-Ab免費(fèi)代測(cè)試劑

抗α-胞襯蛋白抗體ELISA試劑盒 IgG免費(fèi)代測(cè)試劑

抗UACA抗體ELISA試劑盒 IgG免費(fèi)代測(cè)試劑

抗U1小核核糖核蛋白70kDaELISA試劑盒 SNRNP70免費(fèi)代測(cè)試劑

抗sp100抗體ELISA試劑盒 sp100免費(fèi)代測(cè)試劑

抗Sc1-70抗體ELISA試劑盒 Sc1-70-Ab免費(fèi)代測(cè)試劑
查爾酮異構(gòu)酶(CHI)測(cè)試盒苯胺4羥化酶（AH）測(cè)試盒50管/24樣 可見分光光度法

N脫甲基酶（ERND）測(cè)試盒100管/48樣 微量法

N脫甲基酶（ERND）測(cè)試盒50管/24樣 可見分光光度法

細(xì)胞色素b5含量測(cè)試盒100管/96樣 微量法

細(xì)胞色素b5含量測(cè)試盒50管/48樣 可見分光光度法

血鎂濃度測(cè)試盒100管/96樣 微量法

血磷濃度測(cè)試盒100管/96樣 微量法

血鋅濃度測(cè)試盒100管/96樣 微量法

血清鐵濃度測(cè)試盒100管/96樣 微量法